基因扩增仪
首先,要确定你的模板DNA的浓度大概是多少,太稀和太浓都影响PCR结果,通过多次调整浓度才得到较理想的结果。
其次,如果是自己提的DNA,要确保模板中没有酒精(提DNA最后一步,一定要等酒精挥发完才能加TE)
最重要的是要探索一个好的退火温度,退火温度的高低可以以0.5℃的梯度变化确定,假如参考值为61℃,先跑一次,看结果,如果拖尾很长,则一个一个梯度增加退火温度,但不能增得太急。
尽量保证核酸纯净并控制浓度:浓度太低模板量不足,浓度太高杂质含量也就高,易影响Taq酶活性
操作尽量在冰上,传说Taq酶比较脆弱
据说加点BSA可以减少引物二聚体的形成并保护Taq酶的活性
铭科仪器专业代理基因扩增仪